रिकॉम्बिनेंट एंटरोकाइनेज

ये रिकॉम्बिनेंट एंटरोकाइनेज उच्च विशिष्टता के साथ बोवाइन एंटरोकाइनेज की प्रकाश श्रृंखला की एक अत्यधिक शुद्ध तैयारी है और समान क्लीवेज साइट को देशी एंजाइम के रूप में पहचानता है। उत्पाद लाइसिन के सी-टर्मिनल पर अनुक्रम (Asp-Asp-Asp-Asp-Lys) के साथ फ्यूजन प्रोटीन को साफ करता है। एंजाइम पुनः संयोजक ई. कोली में निर्मित होता है और 30,000u/mg की विशिष्टता के साथ उच्च समरूपता के लिए शुद्ध किया जाता है। यह विभिन्न स्थितियों में काम कर सकता है, जैसे कि 4-45 डिग्री, pH4.5-9.5, यहां तक कि कुछ डिटर्जेंट या डेन्चर रिएजेंट्स में भी। गतिविधि i एक इकाई को एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है जो 1x प्रतिक्रिया बफर में 23a पर 16 घंटे में 50I ग्राम फ्यूजन प्रोटीन के 95% को साफ कर देगा। 10x रिएक्शन बफर 500 मिमी ट्रिस-एचसीएल, पीएच 8.0 10 मिमी CaCl 2 1% ट्विन-20 (v/v) 1। 1 लीटर के लिए, 950 मिलीलीटर विआयनीकृत पानी में 60.5 ग्राम ट्रिस बेस घोलें। 2। केंद्रित एचसीएल के साथ पीएच को 8.0 पर समायोजित करें। 3। 1.47 ग्राम CaCl2-2h2o और 10 मिली ट्वीन -20 डालें और मिलाएँ। 4। वॉल्यूम को 1 लीटर तक समायोजित करें। कमरे के तापमान पर स्टोर करें। 200 मिमीोल/एल ट्रिस-एचसीएल में 200 मिमीोल/एल एनएसीएल और 2 एमएमओएल/एल सीएसीएल 2 आई 50% ग्लिसरॉल में भंडारण -20 बजे संग्रहीत स्थिरता -20 ए पर स्थिर है, इसका उपयोग एक वर्ष तक किया जा सकता है